1、抗原准备

2、免疫Balb/C小鼠

3、小鼠抗血清检测(WB:检测内源性蛋白或者ELISA)

4、检测结果合格进行细胞融合及细胞株的筛选,亚克隆,建立稳定分泌抗体的细胞株；保存细胞株

5、细胞株分泌抗体重链(Fcγ)亚型鉴定

6、抗体扩大生产,制备腹水,以及Protein A/G纯化

1、从动物细胞、人或动物组织、细菌、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血清、培养上清等样品

2、对样品中蛋白进行半定量分析

3、Western blot检测

  (1) 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

  (2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

  (3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

  (4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)

4、预实验及正式实验服务:帮助客户设计样品上样顺序以符合论文发表要求

5、免费进行蛋白内参检测(所有内参抗体均免费提供)

1、从动物细胞、人或动物组织、细菌、植物、血清、土壤等样品中提取核酸

2、对核酸进行浓度及纯度分析

3、荧光定量PCR检测

  (1) 引物探针的设计与合成

  (2) 绝对定量和相对定量的选择

  (3) 探针法和染料法的选择

  (4) 荧光定量PCR仪对目的基因的检测

  (5) 数据统计和分析

1、温和条件下进行蛋白抽提,BCA定量,调整蛋白浓度

2、样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育(进行WB验证可以免此步骤)

3、样品与IP抗体进行孵育,之后加入Protein A/G-Agarose进行孵育

4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理

5、沉淀产物SDS—PAGE或者WB鉴定,质谱鉴定由客户自行确定

6、Western blot检测

  (1) 电泳：聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品

  (2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

  (3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

  (4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光

7、预实验及正式实验服务

1、温和条件下进行蛋白抽提,BCA定量,调整蛋白浓度

2、样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育

3、样品与IP抗体进行孵育

4、洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理

5、沉淀产物SDS-PAGE或者WB鉴定(目前暂不提供别的鉴定)

6、Western blot检测

  (1) 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE分离蛋白样品

  (2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)

  (3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)

  (4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,TotalLab Quant软件读取IOD值(可选)

1、 样品甲醛交联固定、终止、收集样品、裂解样品

2、 超声或者酶解处理样品DNA成片段,琼脂糖电泳检

3、 样品预处理:用Protein A/G Sepharose孵育

4、 样品与IP抗体进行孵育

5、 洗涤Protein A/G Sepharose-Antibody-Protein Complex,并对免疫复合物进行变性处理,提取DNA样品

6、 检测

  (1) 实时荧光定量PCR检测(最常用,免费检测)

  (2) DNA芯片检测(需要联系测试厂家,需要另付费。询价)

  (3) DNA产物测序(需要联系测试厂家,需要另付费。询价)

1、以基因组DNA,cDNA,质粒,PCR产物等为模板扩增目的基因

2、将目的基因连接至克隆载体上并测序

3、将目的基因连接至表达载体上并测序

4、表达载体的小试表达验证

5、表达产物SDS—PAGE或者WB鉴定(目前暂无其它鉴定)

6、Western blot检测转染质粒的表达情况

7、表达蛋白体内和体外功能研究

1、sgRNA设计和高效sgRNA筛选

2、sgRNA表达载体构建

3、sgRNA和Cas9质粒共转染细胞和敲除细胞株筛选及鉴定。

1、抗原准备

2、免疫5只Balb/C小鼠

3、抗血清检测(WB:检测内源性蛋白或者ELISA)

4、Protein A纯化

5、抗体鉴定